Nội dung text Bài 08 - Xác định độ phân giải và hiệu lực của bản mỏng trong sắc ký lớp mỏng.docx
Bài 8: XÁC ĐỊNH ĐỘ PHÂN GIẢI VÀ HIỆU LỰC CỦA BẢN MỎNG TRONG SẮC KÝ LỚP MỎNG 1/ Thành phần pha tĩnh dùng trong SKLM? Pha tĩnh này có thể được sử dụng trong sắc kí cột không? Pha tĩnh hay sử dụng trong SKLM là các chất hấp phụ. Các chất hấp phụ này phần lớn có trộn thêm chất kết dính như CaSO4 5-15%, tinh bột 2-5%, dextran, nhưng cũng có trường hợp không dùng chất kết dịnh. Pha tĩnh này không được sử dụng trong sắc kí cột vì bột chất hấp phụ trong SKLM rất mịn, nếu dùng trong sắc kí cột sẽ bị tắc cột, dung môi không chạy được. 2/ So sánh cơ chế của sắc kí pha đảo? pha thuận? Nêu cấu tạo của các loại silicagel dùng trong các cơ chế sắc kí trên? Quá trình sắc ký dựa trên sự hấp phụ mạnh ,yếu khác nhau của pha tĩnh đối với các chất tan và sự rửa giải ( phản hấp phụ ) của pha động để kéo chất tan ra khỏi cột .Sự tách một hỗn hợp phụ thuộc vào tính chất động học của chất hấp phụ . Trong trường loại này có 02 loại hấp phụ : + Sắc ký hấp phụ pha thuận: Pha tĩnh phân cực ,pha động không phân cực . + Sắc ký hấp phụ pha đảo: Pha tĩnh không phân cực ,pha động phân cực Cấu tạo của silicagel: là chất hấp phụ được sử dụng rộng rãi nhất hiện nay, có kích thước hạt 10- 40 micromet, diện tích bề mặt 200-400 m2/g, sắt kim loại được loại bỏ bằng cách lơ lửng, sau đó sấy 120 độ C trong 48h. Tính hấp phụ của silicagel do các nhóm OH trên bề mặt quyết định. 3/ Đối với chất tan có độ phân cực kém, nên lựa chọn những loại silicagel pha thuận hay pha đảo? Nên lựa chọn silicagel pha đảo vì pha đảo có pha tĩnh không phân cực, lúc đó pha tĩnh sẽ có ái lực với chất tan và dễ dàng giữ được chất tan lại. 4/ Nêu và giải thích cơ chế chủ đạo của phương pháp sắc kí lớp mỏng? Cơ chế chủ đạo là cơ chế hấp phụ Vì các chất cần tách trong SKLM có thể khuếch tán theo cả chiều dọc và chiều ngang đối với phương chuyển động của dung môi.Do đó chất làm pha tĩnh cần có đặc tính nở rộng theo cả chiều dọc và chiều ngang 5/ Kể tên vài cách phát hiện các vết trên sắc kí lớp mỏng? - Màu sắc tự nhiên của vết. - Soi dưới đèn UV 254 hoặc 365 nm - Phun thuốc thử hiện màu - Dùng máy đo mật độ quang